鄰苯三酚自氧化法實驗需注意以下方面: - 試劑配制:鄰苯三酚易氧化,務(wù)必現(xiàn)用現(xiàn)配,且溶解用的鹽酸濃度要精準,否則影響溶解與后續(xù)反應(yīng)。緩沖液的pH值極為關(guān)鍵,需用酸度計精確校準,確保反應(yīng)體系pH適宜,否則會干擾鄰苯三酚自氧化及抗氧化物質(zhì)活性。 - 儀器使用:分光光度計需提前預(yù)熱至穩(wěn)定,測量時避開震動、強光等干擾。比色皿要選光程一致、透光性佳的同一套,進行配對校準,使用后及時洗凈,防止殘留試劑干擾下次測量。 - 實驗操作:實驗應(yīng)在恒溫環(huán)境下開展,溫度波動會明顯改變鄰苯三酚自氧化速率,可借助恒溫水浴維持溫度穩(wěn)定。加入鄰苯三酚溶液后,要快速混合并立刻計時測量,保證反應(yīng)起始時間準確。整個過程要保持環(huán)境清潔,防止雜質(zhì)混入,移液器等儀器需定期校準,保障移液體積精準。
鄰苯三酚自氧化法是一種經(jīng)典的用于檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性的方法,也可用于評估其他抗氧化物質(zhì)對超氧陰離子自由基的清除能力。 在堿性條件下,鄰苯三酚會發(fā)生自氧化反應(yīng),生成超氧陰離子自由基和有色的中間產(chǎn)物,該產(chǎn)物在特定波長下有吸收,可通過分光光度計測定吸光度變化來反映自氧化速率。而SOD等抗氧化物質(zhì)能催化超氧陰離子自由基歧化,減少有色產(chǎn)物生成。通過比較加入抗氧化物質(zhì)前后鄰苯三酚自氧化反應(yīng)的吸光度變化,就能計算出抗氧化物質(zhì)對超氧陰離子自由基的清除率,進而得出SOD等的活性。 該方法操作簡便,所需儀器設(shè)備常見,且靈敏度較高,能快速得到實驗結(jié)果,在生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品科學(xué)等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,可用于研究生物體內(nèi)抗氧化酶活性、探索疾病發(fā)生機制及評價食品抗氧化性能等。但它也有不足,實驗條件如溫度、pH值等對結(jié)果影響大,需嚴格控制,而且只能間接反映抗氧化物質(zhì)的作用,與體內(nèi)真實情況存在差異。
鄰苯三酚自氧化法主要應(yīng)用于以下領(lǐng)域: - 生物化學(xué)領(lǐng)域:常用于測定生物體內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)的活性。SOD是一種重要的抗氧化酶,能夠清除細胞內(nèi)產(chǎn)生的超氧陰離子自由基,維持細胞內(nèi)氧化 - 還原平衡。通過鄰苯三酚自氧化法測定SOD活性,可以了解生物體在不同生理狀態(tài)(如疾病、衰老、應(yīng)激等)下的抗氧化能力變化,為研究相關(guān)生理過程和疾病機制提供重要參考。還可用于篩選具有抗氧化活性的生物分子,如植物提取物、天然化合物、抗氧化肽等,為開發(fā)新型抗氧化藥物和保健品提供依據(jù)。 - 食品科學(xué)領(lǐng)域:用于評估食品中抗氧化劑的功效。通過該方法可以測定不同食品添加劑、天然抗氧化劑(如維生素C、維生素E、茶多酚等)對超氧陰離子自由基的清除能力,從而為食品保鮮、品質(zhì)控制和營養(yǎng)強化提供理論支持,有助于開發(fā)具有更高抗氧化性能的食品配方,延長食品貨架期,提高食品的營養(yǎng)價值和安全性。 - 藥物研發(fā)領(lǐng)域:在藥物研發(fā)過程中,可用于評價藥物的抗氧化活性及對氧化應(yīng)激相關(guān)疾病的潛在治療作用。研究人員可以利用該方法篩選具有抗氧化作用的藥物候選化合物,評估藥物在體外對超氧陰離子自由基的清除效果,為開發(fā)治療氧化應(yīng)激相關(guān)疾?。ㄈ缧难芗膊 ⑸窠?jīng)退行性疾病、癌癥等)的藥物提供實驗依據(jù)。
沒食子酸丙酯是一種常用的食品抗氧化劑,以下是一些可能含有該物質(zhì)的食物: - 油脂類:食用植物油,如大豆油、玉米油、葵花籽油等,以及動物油脂如豬油、牛油等,在加工過程中為了防止油脂氧化酸敗,可能會添加沒食子酸丙酯來延長保質(zhì)期。 - 油炸食品:像薯片、薯條、炸雞等油炸食品,由于含有較多油脂且在加工過程中易發(fā)生氧化反應(yīng),商家可能會添加沒食子酸丙酯來保持食品的品質(zhì),延緩油脂酸敗,使其保持良好的口感和風(fēng)味。 - 肉制品:一些加工肉制品,如香腸、火腿、臘肉等,為了防止其中的脂肪氧化變質(zhì),保持肉的色澤和風(fēng)味,可能會添加沒食子酸丙酯等抗氧化劑。 - 餅干類:特別是富含油脂的餅干,如曲奇餅干等,為了防止油脂氧化導(dǎo)致餅干產(chǎn)生哈喇味,影響口感和品質(zhì),可能會添加沒食子酸丙酯來起到抗氧化作用。
沒食子酸丙酯對人體是否有害需視情況而定。 在適量使用的情況下,沒食子酸丙酯一般被認為是安全的。它是一種常見的食品抗氧化劑,能防止油脂等食品成分氧化變質(zhì),延長食品保質(zhì)期。在規(guī)定的使用范圍和限量內(nèi)添加到食品中,經(jīng)過安全性評估,不會對人體健康造成明顯危害。 然而,如果過量攝入沒食子酸丙酯,可能會對人體產(chǎn)生不良影響。有研究表明,長期大量攝入可能會對肝臟、腎臟等器官造成一定負擔,影響其正常功能。它還可能與人體內(nèi)的一些物質(zhì)發(fā)生相互作用,干擾正常的生理代謝過程。此外,部分人群可能對沒食子酸丙酯過敏,接觸或攝入后會引發(fā)過敏反應(yīng),如皮膚瘙癢、紅腫、呼吸急促等癥狀。 沒食子酸丙酯在合理使用時是相對安全的,但過量攝入或個體存在特殊情況時,可能會對人體健康有害。
沒食子酸丙酯(PG)與其他抗氧化劑相比,具有以下優(yōu)勢: - 抗氧化效果強:PG具有多個酚羥基結(jié)構(gòu),能提供活潑氫與自由基結(jié)合,有效清除自由基,阻止油脂等物質(zhì)氧化,抗氧化能力優(yōu)于許多常見抗氧化劑,如叔丁基對羥基茴香醚(BHA)等。在油脂和含油食品中添加少量PG,就能顯著延長其保質(zhì)期,保持風(fēng)味和品質(zhì)。 - 穩(wěn)定性良好:PG在不同環(huán)境條件下表現(xiàn)出較好的穩(wěn)定性。它具有一定的熱穩(wěn)定性,在食品加工的高溫條件下,如油炸、烘焙等過程中,能保持抗氧化活性,發(fā)揮抗氧化作用。同時,在不同pH值環(huán)境中也相對穩(wěn)定,適用范圍較廣,無論是酸性還是中性食品體系,都能有效發(fā)揮抗氧化功效。 - 協(xié)同增效性佳:PG能與其他抗氧化劑、增效劑復(fù)配使用,產(chǎn)生協(xié)同增效作用。例如與丁基羥基甲苯(BHT)、維生素C等復(fù)配,抗氧化效果比單一使用時更強,還可減少其他抗氧化劑的使用量,降低成本。此外,PG與金屬離子螯合劑如檸檬酸等配合使用,能增強抗氧化效果,通過螯合金屬離子,減少其對氧化反應(yīng)的催化作用,更好地抑制油脂氧化。
沒食子酸丙酯微溶于水,易溶于乙醇、丙二醇、乙醚等有機溶劑。 在水中,由于其分子結(jié)構(gòu)中雖含有羥基等親水基團,但同時也有較大的疏水烴基部分,導(dǎo)致它在水中的溶解度較小。一般情況下,常溫下沒食子酸丙酯在水中只能溶解少量,隨著溫度升高,其在水中的溶解度會有所增加,但總體仍屬于微溶狀態(tài)。 而在乙醇等有機溶劑中,沒食子酸丙酯的溶解性較好。這是因為有機溶劑的分子結(jié)構(gòu)與沒食子酸丙酯具有一定的相似性,根據(jù)“相似相溶”原理,沒食子酸丙酯能夠較好地分散在有機溶劑中,形成均勻的溶液。例如在食品加工行業(yè)中,常利用其易溶于乙醇的特性,將沒食子酸丙酯先溶解在乙醇中,再添加到食品體系中,以發(fā)揮其抗氧化作用。
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